派思维新 | 肿瘤动物模型助力三阴性乳腺癌临床前药效研究

01.研究背景

最新数据显示，乳腺癌已成为女性恶性肿瘤发病率第1位的疾病。乳腺癌的分型多种多样，其中三阴性乳腺癌（TNBC）因预后极差被称为“乳腺癌之王”，晚期TNBC的5年生存率仅为11%。TNBC患者雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和原癌基因（HER-2）均为阴性，且具有特殊的生物学行为和临床病理特征，缺乏有效的治疗靶点，侵袭性强，具有较高的复发风险和死亡率^[1-4]。目前，手术仍然是治疗乳腺癌的首选治疗方案，切除乳腺肿瘤可以阻止肿瘤进展或扩散，但术后需要进行化疗等措施，改善远期预后。通过长期随访发现，TNBC患者即使经过规范化治疗，仍存在较高复发转移风险，应寻找新的治疗靶点，以提高治疗针对性，以便更好的改善患者预后。

TNBC临床相关靶点主要为BRCA1/2、VEGF、免疫指标MSI/PD-L1/TMB等^[5-6]。目前与BRCA1/2相关的主要药物有PARP抑制剂奥拉帕利，VEGF靶点相关药物有贝伐珠单抗，MSI/PD-L1免疫相关药物有帕博利珠单抗等^[7]。BRCA1/2突变与PARP抑制剂的使用相关，BRCA的主要抗肿瘤机制是阻断PARP参与DNA损伤修复，加重细胞DNA损伤。此外，PARP抑制剂可通过协同致死效应杀死BRCA突变的肿瘤细胞。VEGF主要涉及RTKs信号通路，是TNBC靶向治疗的重要靶点之一。贝伐单抗作为一种新型抗VEGF药物，在患者治疗及安全性方面均具有良好的效果^[8]。PD-L1一般表达在肿瘤细胞和抗原提呈细胞等表面，PD-1是活化T细胞的抑制性受体，肿瘤细胞表面的PD-L1和活化T细胞的 PD-1 结合后，会抑制T细胞，导致T细胞无法识别肿瘤细胞，从而实现免疫逃逸，阻断PD-1/PD-L1信号通路主要是恢复T细胞免疫功能起到抗肿瘤作用。因此，基于免疫抑制靶点PD-1/ PD-L1 抑制剂能够调节机体的抗肿瘤免疫反应，进而发挥抗肿瘤作用。此外，有研究证明，SNRNP200是糖酵解TNBC的关键驱动因素，可以促进异常细胞代谢，特别是在乳酸和谷胱甘肽途径中，并赋予对免疫检查点阻断的抵抗力^[9]。这些发现促使SNRNP200成为一个有潜力的治疗靶点，糖酵解TNBC中的乳酸脱氢酶（LDH）抑制剂，已经取得一定的显著进展。派思维新拥有众多TNBC动物模型，可以用于评价各药物在体内的治疗效果。

02.派思维新乳腺癌模型案例分享

2.1 4T1皮下模型

细胞照片及生长曲线

在携带SNRNP200靶点的4T1肿瘤小鼠皮下模型中，我们设立Positive Control组，统计肿瘤体积变化、小鼠体重变化等结果，结果显示，Positive Control具有一定的抗肿瘤作用。

肿瘤体积及小鼠体重变化情况

此外，在4T1小鼠皮下模型中，我们还设立IgG2α组、Positive Control组以及Positive Control+anti-PD-1联合治疗组，统计肿瘤体积变化、小鼠体重变化、流式细胞术分析等结果，结果显示，Positive Control及Positive Cotrol+anti-PD-1联合治疗均具有一定的抗肿瘤作用。其中，联合治疗产生了更加明显的免疫反应，CD8⁺T细胞比例显著增加。此外，Positive Control及联合治疗均降低了CD25⁺Foxp3⁺调节性T细胞比例。

肿瘤体积及小鼠体重变化情况

肿瘤组织流式细胞术分析结果

2.2 MDA-MB-231-luc原位模型

在BALB/c nude小鼠的右侧乳腺进行乳腺原位接种，接种后第3天进行一次活体成像拍摄，确认是否成功建立乳腺原位模型。接种后第8天根据原位的生物发光值进行随机分组给药。结果显示，G2组与联合治疗组均具有一定的抑瘤作用。

原位肿瘤生物发光值（p/s）

原位肿瘤重量及小鼠体重变化情况

2.3 4T1-luc转移模型

BALB/c小鼠上经尾静脉注射4T1-luc细胞，建立转移模型。转移模型建立3天后，进行随机分组给药。统计转移情况、小鼠体重、生存期等。结果显示，给药组可抑制肿瘤细胞向其他脏器转移，且对小鼠体重及生存期没有显著影响。

小鼠体重及生存期变化情况

心、肝、脾、肺生物发光值（p/s）

2.4 MDA-MB-231人乳腺癌人源化模型

流式检测了PBMC接种后2W，3W，4W抗凝全血，验证了huCD45的百分比，并在MDA-MB-231人源化模型上进行了药效研究。

MDA-MB-231人乳腺癌人源化模型药效研究

2.5 MDA-MB-468人乳腺癌人源化模型

流式检测了PBMC接种后2W，3W，4W抗凝全血，验证了huCD45的百分比，并在MDA-MB-468人源化模型上进行了药效研究。

MDA-MB-468人乳腺癌人源化模型药效研究

派思维新利用多种动物模型，为TNBC的临床前药效研究提供精准的模型数据。目前，派思维新已经为多家药企和科研单位提供稳定可靠的模型数据，推动了TNBC临床前药效研究。

参考文献

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