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细胞增殖

MTT

MTT通过内吞作用被吸收,活细胞中的线粒体以及内体/溶酶体将外源性MTT运输到细胞表面,还原为针状蓝紫色结晶甲臜(Formazan)


CCK8 

CCK8(细胞计数)方法的原理是WST-8四唑盐,化学名:(2-(甲氧基-4)-硝基苯基)-3/(4-硝基苯基)-3/(4-硝基苯基)-3/(4-硝基苯基)-3/(4-硝基苯基)-3/(4-硝基苯基L)5,5-(2,4-二硫酸苯)-2H四唑)可以通过活细胞脱氢酶还原成橙色甲胺染料,然后在A450nm处,测量其吸光度值。产生的甲胺量与活细胞的数量成正比。CCK8方法的生长曲线可以维持约6天左右,每天收集细胞样本在1-6天内进行测试。

CCK-8和MTT测定方法间的区别在于CCK-8涉及细胞中的大部分脱氢酶。另一方面,MTT仅涉及线粒体脱氢酶。因此,MTT测定取决于线粒体活性,而不是细胞本身。



示例


The effect of different treatments on cell viability over time

三种细胞系(从左到右:HepG2、Huh7 和 SNU449)的不同剂量时间下的多柔比星剂量-反应曲线。在实验期间,细胞保持在正常氧(顶部)或用100μM CoCl2制造的化学缺氧环境下(底部)。显示每次DOX浓度剂量的平均值(符号)和标准偏差(误差线);每个测试浓度至少使用6个重复实验来验证。

 


参考文献

Dubbelboer IR, Pavlovic N, Heindryckx F, Sjögren E, Lennernäs H. Liver Cancer Cell Lines Treated with Doxorubicin under Normoxia and Hypoxia: Cell Viability and Oncologic Protein Profile. Cancers (Basel). 2019;11(7):1024. Published 2019 Jul 20. doi:10.3390/cancers11071024